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RT-PCR方法--端粒酶活性檢測
發(fā)布時間： 2025-04-24 點擊次數(shù)： 476次檢測意義
1、臨床上：觀測是否有腫瘤。
2、工業(yè)客戶：間接考察細胞是否有成瘤的可能性。
端粒酶活性檢測的主要方案
1、直接檢測端粒酶（蛋白及RNA的結(jié)合復(fù)合物）的活性，檢測它是否可以延伸DNA模板，然后跑膠或者探針雜交，檢測DNA延伸的長度，以此來判斷端粒酶的活性高低。
該方法操作較復(fù)雜，靈敏度不高。
2、間接檢測端粒酶（催化亞基的mRNA量）的活性。
該方法靈敏度高，操作相對簡便。
YH端粒酶活性檢測原理
雙色熒光探針分別檢測端粒酶催化亞基TERT基因mRNA和內(nèi)參基因GAPDH mRNA。在進行樣本檢測時，同時檢測陽性細胞293T和陰性MRC-5細胞做為對照，利用??CT法計算樣本中TERT基因的相對表達量。
檢測所用主要儀器
熒光定量PCR： Real Time PCR System(ABI 7500，U.S.A)
RNA質(zhì)控：Nanodrop 2000C Spectrophotometer(Thermo scientific，Germany）
檢測所用試劑
RNA抽提試劑盒：RNAiso Plus kit(Code No.9108/9109，TaKaRa，Japan)
RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒： RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(00820611，Thermo scientific，Germany)
雙色熒光TERT基因檢測試劑盒：上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司自研
陽性對照：293T細胞
陰性對照：MRC-5細胞（正常的人胚肺細胞）
銷售熱線
主營產(chǎn)品：主要技術(shù)服務(wù)：細胞STR鑒定；支原體檢測；細胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
產(chǎn)品分類
推薦產(chǎn)品：主要技術(shù)服務(wù)：細胞STR鑒定；支原體檢測；細胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
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