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主營產品:主要技術服務:細胞STR鑒定;支原體檢測;細胞種屬檢測;端粒長度檢測;端粒酶活性檢測等。
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    熒光定量 PCR 一站式解決方案(2)

    發布時間: 2025-07-30  點擊次數: 311次


    熒光定量的定量方法

    絕對定量是用一系列已知濃度的標準品制作標準曲線,在相同的條件下目的基因測得的熒光信號量同標準曲線進行比較,從而得到目的基因的量

    圖片1111.png

     

    相對定量:是通過與內參基因Ct值之間的相差來計算表達基因的差異,也稱之為2-??Ct。

    image.png 

     

    熒光定量擴增曲線

    隨著PCR反應的進行,擴增產物不斷累積,熒光信號強度不斷增加,每經過一個循環,收集一次熒光信號,通過熒光信號強度的變化檢測擴增產物量的變化,從而到擴增曲線圖

     

    圖片2222.png

     

    縱坐標:Rn(熒光值)     橫坐標:Cycle(循環數)

    熒光定量PCR檢測技術路線

    圖片3333.png

     

    樣本要求

    1.基因信息: 客戶提供盡可能詳細的背景信息;物種信息,基因名稱,樣本數等。

    2.RNA樣本:RNA質量要求260/280吸光度值≥2.0,瓊脂糖電泳帶型不彌散;濃度要求:≥50ng/μl;體積:≥20μl。1.5ml或者2.0ml離心管管口用封口膜密封;96孔PCR板,必須用硅膠蓋或者定量PCR的膜密封;寄樣時需將樣本固定,用泡沫等物品把寄樣箱子空間填滿;不可使用錫箔紙和保鮮膜封口。

    3.常規動物組織:需保存在1.5ml或2.0ml離心管,液氮速凍5min以上,放置于-80℃保存,送樣時干冰保存郵寄。

    4.軟體動物組織:沖洗干凈淤泥之后液氮速凍干冰保存郵寄。送樣量:200mg-2g

    5.細胞樣本:細胞數106以上

    6.不推薦提供RNA或cDNA樣品,除非您能充分證明所提供RNA/cDNA是高質量的且可用于熒光定量PCR。

     

                                                                                                                            


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