三種常見病原菌

綠膿桿菌（Pa）是革蘭氏陰性桿菌，廣泛存在于自然界中，常寄生于人和動物的體表、呼吸道、消化道，免疫力下降是重要的發病誘因，在燒傷感染中綠膿桿菌檢出率較高。綠膿桿菌是SPF級小鼠必檢項目, 主要定植于腸道內和糞便中。對實驗動物而言，SPF 小鼠及無菌小鼠被綠膿桿菌感染后，多數不表現癥狀，當宿主免疫系統受損，常可引起感染、炎癥、敗血癥甚至死亡等。但進行醫藥、生物制品實驗時，常影響試驗結果，導致實驗的失敗，故綠膿桿菌已被列為無特定病原體小鼠必須排除的細菌之一。

產酸克雷伯菌(Ko)是克雷伯菌屬中的一個重要物種，形態呈直桿狀，大多數菌株具有多糖莢膜，無鞭毛，無芽孢。產酸克雷伯菌目前未被列為SPF級動物必須排除的病原體。但是產酸克雷伯菌是實驗室常見病原菌，被杰克遜（JAX）實驗室明確列為“排除性病原體"，即其供應的所有品系實驗動物（尤其是免疫缺陷品系）均要求無此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風險群體，研究發現，免疫缺陷小鼠中產酸克雷伯菌的檢出率達4.55%。

奇異變形桿菌（Pm）屬于變形桿菌屬，是一種重要的條件致病菌。菌體呈直桿狀，具有周身鞭毛，因此運動性非常活躍。顯著的特征之一是在固體培養基（如營養瓊脂）上的“遷徙生長"或“群游"現象。

常見病原菌的檢測

這三種菌在清潔級實驗動物中檢出率較高，檢測目前多采用培養法的檢測方法, 即通過分離培養、菌落形態特征和生化反應特征來確定動物體中是否感染病原菌。通過幾天的培養后觀察病原菌的形態、染色等生化反應，判斷菌的種類，這種檢測方法對實驗人員的經驗要求比較高，培養時間比較長，需要一種快捷的檢測方案實現三種菌的檢測，并且檢測準確度高，靈敏度高。

當前檢測病原菌的一種有效的手段是qPCR的檢測方案。翼和生物開發的Biowing®SPF級大小鼠常見病原菌qPCR檢測試劑盒，采用高靈敏度和特異性的探針法qPCR技術，專為在多種樣本類型中快速、高靈敏地篩查SPF級實驗室大小鼠常見的病原菌而設計，可快速檢測綠膿桿菌（Pa）、產酸克雷伯菌(Ko)、奇異變形桿菌（Pm）常見病原菌。一管中分別在FAM（銅綠假單胞菌Pa），HEX（產酸克雷伯菌Ko），ROX（奇異變形桿菌Pm）三個通道檢測3種病原菌。另外設計一套引物探針在CY5通道檢測內參DNA。該試劑盒具有以下特點：靈敏：檢測靈敏度較高，10 CFU可被有效檢出。穩定：全程閉管操作，無交叉污染。可靠：含內參對照，避免假陰性。方便：操作簡單，一步法檢測。